本期着重对消毒产品生产洁净室（区）要求及检测方法进行详细阐述。

国家卫生部于2009年06月09日发布消毒产品生产企业卫生规范，发布文号：卫监督发〔2009〕53号，并于2010年01月01日实施。为规范消毒产品生产企业卫生管理，保证消毒产品卫生质量和使用安全，根据《中华人民共和国传染病防治法》及《消毒管理办法》等法律法规的有关要求，卫生部制定消毒产品生产企业卫生规范（2009年版），凡中华人民共和国境内从事消毒产品生产（含分装）的单位和个人应遵守消毒产品生产企业卫生规范（2009年版），文件发布后又对部分印刷错误做出了修改，修改正文如下：

依据《卫生部关于修改《公共场所卫生管理条例实施细则》等规范性文件部分内容的通知》对本法规作出如下修改：

将《消毒产品生产企业卫生规范（2009年版）》（卫监督发〔2009〕53号）第四十六条中的“病毒性肝炎”修改为：“甲型病毒性肝炎、戊型病毒性肝炎”。删除入学、就业体检表（包括体检项目）中涉及乙肝项目检测的有关内容，即：乙肝病毒感染标志物检测，包括乙肝病毒表面抗原、乙肝病毒表面抗体、乙肝病毒e抗原、乙肝病毒e抗体、乙肝病毒核心抗体和乙肝病毒脱氧核糖核苷酸检测等，俗称“乙肝五项”和HBV-DNA检测等。

依据《卫生部监督局关于更正《消毒产品生产企业卫生规范》印刷错误的通知》对《消毒产品生产企业卫生规范（2009年版）》存在个别印刷错误，现更正如下：

一、     第四十四条

删去“装配和包装车间空气细菌菌落总数。”中的“装配和包装车间”。

二、     第五十条

（一）    10万级洁净度净化车间中“空气细菌菌落总数≤500cfu/m³”更正为“空气细菌菌落总数≤500cfu/m³（浮游菌）或≤10cfu/皿（沉降菌）”；物体表面细菌菌落总数单位“cfu/皿”更正为“cfu/cm²”。

（二）    30万级洁净度净化车间中“物体表面细菌菌落总数≤15cfu/皿”更正为“空气细菌菌落总数≤15cfu/皿（沉降菌）”。

2017年修订：

依据：国家卫生计生委关于修改《新消毒产品和新涉水产品卫生行政许可管理规定》等5件规范性文件部分条款的通知，对本法规作出如下修改：

将第四十六条第一款修改为：“企业应当严格按照国家有关标准，加强直接从事消毒产品生产的操作人员的健康管理。”

1、与消毒产品生产洁净室（区）相关的要求：

消毒产品生产洁净室（区）环境要求及检测依据

2、检测方法

2.1温湿度的检测

2.1.1无恒温恒湿要求的温湿度检测应符合下列要求；

1室内空气温度和相对湿度测定之前，空调净化系统应已连续运行至少8h。

2温度的检测可采用玻璃温度计、数字式温湿度计；湿度的检测可采用通风式干湿球温度计、数字式温湿度计、电容式湿度检测仪或露点传感器等。根据温湿度的波动范围，应选择足够精度的测试仪表。温度检测仪表的最小亥刻度不宜高于0.4℃，湿度检测仪表的最小刻度不宜高于2%。

测点为房间中间一点，应在温湿度读数稳定后记录。测完室内温湿度后，还应同时测出室外温湿度。

2.1.2有恒温恒湿要求房间的温湿度检测应符合下列要求；

1选择以下检测仪器；

1）温度计∶采用铂电阻、热电偶或其他类似温度传感器组成测温系统；

2）湿度计∶可采用干湿球温度计或其他固态湿度传感器组成测湿系统。

2检测方法与步骤如下∶

1）室内空气温度和相对湿度测定之前，空调系统应已连续运行至少12h;

2）根据温度和相对湿度波动范围（表1），应选择相应的具有足够精度的仪表进行测定。根据由低到高的精度，测定宜连续进行（8～48）h，每次测定间隔不应大于30min;

3）室内测点可在送回风口处或在恒温恒湿工作区具有代

表性的地点布置。测点一般应布置在距外墙表面大于0.5m、距地0.8m的同一高度上；也可以根据恒温恒湿区的大小，分别布置在离地不同高度的几个平面上。具体测点数应符合表1的规定。

表1有恒温恒湿要求时的温、湿度测点数

 2.2风速的检测

2.2.1风速检测必须首先进行，净化空调各项效果必须是在设计的风量风速条件下获得。

2.2.2风速检测前必须检查风机运行是否正常，系统中各部件安装是否正确，有无障碍，所有阀门应固定在一定的开启位置上，且必须实际测量被测风口、风管尺寸。

2.2.3测定室内微风速仪器的最小刻度或读数不应大于0.02m/s，一一般可用热球式风速仪，需要测出分速度时，应采用超声波三维风速计。

2.2.4对于单向流洁净室，可采用室截面平均风速和截面积乘积的方法确定送风量，垂直单向流洁净室的测定截面取距地面0.8m的无间隔面（孔板、格栅除外）的水平截面，如有阻隔面，该测定截面应抬高至阻隔面之上0.25m；水平单向流洁净室取距送风面0.5m的垂直于地面的截面，截面上，测点间距不应大于1m，一般取0.3m。测点数应不少于20个，均匀布置。

2.2.5对于非单向流洁净室，内安装过滤器的风口可采用套管法、风量罩法或风管法测定风量，为测定回风口或新风口风量，也可用风口法。

2.2.6用任何方法测定任何洁净室风口风速时风口上任何配件、饰物一律保持原样。

2.2.7换气次数计算公式

 2.3静压差的检测

2.3.1静压差的测定应在所有房间的门关闭时进行，有排风时，应在最大排风量条件下进行，并宜从平面上最里面的房间依次向外测定相邻相通房间的压差，直至测出洁净区与非洁净区、室外环境（或向室外开口的房间）之间的压差。

2.3.2有不可关闭的开口与邻室相通的洁净室，还应测定开口处的流速和流向。

 2.4尘埃数的检测

2.4.1室内检测人员应控制在最低数量，不宜超过2人，面积超过100㎡又需快速完成测定任务时可适当增加人数。人员必须穿洁净服，应位于测点下风向并原理测点，动作要轻，保持静止。

2.4.20.5μm及5μm微粒的检测应符合以下要求：

1）采用尘埃粒子计数器测定0.5μm及5μm微粒应根据以下步骤计算空气洁净度级别

室内平均含尘浓度和各测点平均含尘浓度的标准误差

表2：洁净度评级标准

——每个采样点上连续3次或3次以上稳定读数的平均值；注：n测点数

——各店平均值中的最大值；

t——置信上限为95%时，2～9点采样时单侧t分布的系数，其值见下表。

表3：级别浓度上限

表4：系数t

2.4.3测点数按下表选用

采样点应均匀分布于洁净室或洁净区的整个面积内，并位于工作区高度（取距地面0.8m，或根据工艺商定），当工作区分布于不同高度时，可以有1个以上测定面。

2.4.4乱流洁净室（区）内采样点不得布置在送风口正下方。

2.4.5每一测点上每次的采样必须满足最小采样量，100000级及300000级最小采样量应不小于2L。

2.4.6每次采样点数应满足可连续记录下3次稳定的相近数值，3次平均值代表该点数值。

测单向流动时，采样头应对准气流；测非单向流动时，采样头一律向上。

2.5浮游菌的检测

2.5.1使用单级或多级撞击式采样器、离心采样器或过滤采样器，采样必须按所用仪器说明书的步骤进行，特别要注意检测之前对仪器消毒灭菌，并对培养皿或培养基条做阴性对照。

2.5.2采用点数参照下表：

2.5.3采样点应在离地0.8m髙平面上均匀布置，或经委托方（用户）与检测方协商确定。乱流洁净室内不得在送风口正下方布点。静态或空态检测前对室内各种表面应作擦拭消毒。

2.5.4每点采样1次，如工艺无特殊要求，每次采样量应大于等于下表推荐的浮游菌最小采样量。每次采样时间不宜超过15min，不应超过30min。当洁净度很高，或预期含菌浓度可能很低时，采样量应大于最小采样量很多，以满足减少计数误差的要求。

2.5.5采样器应用支架固定，采样时检测人员应退出，手持离心式采样器除外。

2.5.6采样后宜在2h之内将采样器中的培养皿或培养基条送入培养箱中培养。

2.5.7每点平均值取到小数点后1位。

2.5.8动态监测的测点位置、数量和高度由工艺并经协商确定。每间洁净室或每一个独立受控环境中各点总采样量，不分级别，均应大于1m。每点可用多台采样器。

2.5.9当单皿菌落数太大受到质疑时，可按以下原则之一进行处理：

1）作为坏点剔除；

2）重测，如结果仍大，以两次平均值为准；如结果很小，可再重测；

3）重测该处微粒浓度，参考此结果作出判断。

所有上述处理方法均应记录在案。

2.6沉降菌的检测

2.6.1使用直径φ90mm的培养皿采样。当采用其他直径培养皿时，应使其总面积和φ90mm皿总面积相当。

2.6.2培养皿中灌注胰蛋白酶大豆琼脂培养基，必须留样作阴性对照。

2.6.3培养皿表面应经适当消毒清洁处理后，布置在有代表性的地点和气流扰动极小的地点。在乱流洁净室内培养皿不应布置在送风口正下方。

2.6.4当用户没有特定要求时，培养皿应布置在地面及其以上0.8m之内的任意高度。

2.6.5每一间洁净室或每一个控制区应设1个阴性对照皿。

2.6.6动态监测时也可协商布点位置和高度。

2.6.7培养皿数应不少于微粒计数浓度的测点数，如工艺无特殊要求应大于等于表中的最少培养皿数，另外各加1个对照皿。

2.6.8当延长沉降时间时，可按比例减少最少培养皿数，为防止脱水，最长沉降时间不宜超过1h，当所需沉降时间超过1h，可重叠多皿连续采样。除非经过验证，证明更长的沉降时间可以基本按比例增加菌落数。

2.6.9培养皿应从内向外布置，从外向内收皿。

2.6.10每布置完1个皿，皿盖只允许斜放在皿边上，对照皿盖挪开即盖上。

2.6.11布皿前和收皿后，均应用双层包装保护培养皿，以防污染。

2.6.12收皿后皿应倒置摆放，并应及时放入培养箱培养，在培养箱外时间不宜超过2h。如无专业标准规定，对于检测细菌总数，培养温度采用（35〜37）℃，培养时间为（24〜48）h；对于检测真菌，培养温度（27〜29）℃，培养时间3d。

2.6.13布皿和收皿的检测人员必须穿无菌服，但不得穿大褂。头、手均不得裸露，裤管应塞在袜套内，并不得穿拖鞋。

2.6.14对培养后的皿上菌落计数时，应采用5〜10倍放大镜查看，若有2个或更多的菌落重叠，可分辨时则以2个或多个菌落计数。

2.6.15当单皿菌落数太大受到质疑时，可按以下原则之一进行处理：

1）作为坏点剔除；

2）重测，如结果仍大，以两次平均值为准；如结果很小，可再重测；

3）重测该处微粒浓度，参考此结果作出判断。

所有上述处理方法均应记录在案。

2.6.16毎皿平均菌落数取到小数点后1位。

2.6.17动态监测时每点叠放多个平皿或采用可自动切换的仪器，每点应釆满4h以上，每皿可采30min。当只放1个皿时，可少于4h，但不可少于1h。

2.7物体表面细菌菌落数

2.7.1对于洁净室内围护结构、设备等表面的微生物采样，应采用无菌棉拭子擦抹法，当表面很大，硬且平时，也可采用接触皿法。

2.7.2用规格板标定出面积为25cm²的区块，对于围护结构，每面结构不少于4块，对于设备，每件不少于2块，取样地点均协商确定。

2.7.3将无菌棉拭于含10mL稀释液试管中浸湿，于管壁上挤干后，对一区块擦抹采样，横竖往返8次。每一区块使用1根无棉拭。采样后。以人无菌操作方式业棉式采样端剪入原稀释液试管中，经电动混匀器震荡20s或在手掌振打200次。

2.7.4取含菌液体1.0mL，以琼脂灌注法接种平皿，每个样本接种2个平Ⅲ，于（35～37）℃培养箱中培养（24～48）h后计数。

2.7.5必须将本次检测所用的稀释液、棉拭子、培养基等留样作阴性比照。

2.7.6具体事项遵照卫生部《消毒技术规范》执行。

2.7.7对于使用接触Ⅲ采样的表面，以无菌操作方式，先将培养基注入硬质或软质φ55平皿，使培养基表面高出培养皿周边，测试时，将培养皿倒过来，使培养基表面均匀牢固地按压住整个区域5s，不得有环形或线性的运动。

2.7.8对于围护结构，每面结构应用不少于4个培养皿按压，对于设备，每件用不少于2个培养皿按压。

2.7.9按压取样后的培养皿，应在2h之内，于（35～37）℃培养箱中培养（24～48）h后计数。

2.7.10菌类平均数取到小数点后1位。

2.8细菌菌落总数检测

2.8.1样品采集

在动态下进行。

室内面积不超过 30 m²，在对角线上设里、中、外三点，里、外点位置距墙1 m；室内面积超过 30 m²，设东、西、南、北、中 5点，周围 4 点距墙1m。

采样时，将含营养琼脂培养基的平板（直径9 cm）置采样点（约桌面高度），打开平皿盖，使平板在空气中暴露 5 min。

2.8.2 细菌培养

在采样前将准备好的营养琼脂培养基置 35 C土2 C培养 24h，取出检查有无污染，将污染培养基剔除。

将已采集的培养基在6 h 内送实验室，于 35 C土2C培养 48 h 观察结果，计数平板上细菌菌落数。

2.8.3 菌落计算

式中：——空气中细菌菌落总数，cfu/m²;

A——平板上平均细菌菌落数；

S₁——平板面积，cm²;

t——暴露时间，min；

2.9.2工作台面与工人手表面细菌菌落总数

工作台：将经灭菌的内径为5cm×5cm的灭菌规格板放在被检物体表面，用一浸有灭菌生理盐水的棉签在其内涂抹10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检。

工人手：被检人五指并拢，用一漫湿生理盐水的棉签在右手指曲面，从指尖到指端来回涂擦10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放人含10ml灭菌生理盐水的采样管内送检。

将已采集的样品在6h内送实验室，每支采样管充分混匀后取1mL样液，放入灭菌平皿内，倾注营养琼脂培养基，每个样品平行接种两块平皿，置35℃士2℃培养48h，计数平板上细菌菌落数。

式中：——工作台表面细菌菌落总数，cfu/m²;

A——平板上平均细菌菌落数；

S₂——采样面积，cm²;

——工人手表面细菌菌落总数，cfu/只手；

2.10工人手表面致病菌

具体见GB15979-2002《一次性卫生用品卫生标准》附录B，后期进行详细阐述。